对话|中南医院检验科主任:检测阶段导致“假阴性”可能性小

澎湃新闻记者 廖艳 实习生 赵雨萌 发自武汉

2020-02-12 22:05 来源:澎湃新闻

字号
针对病毒核酸检测中“假阴性”现象频发,国家卫健委日前发布的《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第五版)》表示,湖北省内疑似病例具有肺炎影像学特征者可作为临床诊断病例。
2月11日,澎湃新闻(www.thepaper.cn)记者实地探访武汉大学中南医院临床基因扩增检验室,就核酸试剂盒研究工作如何进行、核酸检测“假阴性”和结果偏差等问题与该院检验科主任李一荣进行对话。
新型冠状病毒的检测包括“样本采集”“直接或灭活后提取核酸”“扩增检测核酸”三部分。
澎湃新闻在现场看到,进入临床基因扩增检验室之前,会经过一段缓冲区域,地上贴有两个方向的黄色地标,往左走是清洁区,往右走是污染区。
沿着指示地标往右走,第一扇门口放着一瓶“消毒液”。李一荣介绍,如果没有接触污染的体液或者血液样本,实验室工作人员进入或者离开实验室时,都要将手消毒,进行处理,防止把病源、病毒和细菌带去或带离实验室。
继续深入,来到微生物检验的实验室,实验室内摆放着血培养仪、质谱仪等检测设备。另一个实验工作区域,有穿戴防护装备的工作人员正在工作,旁边放了样本试剂。“这些仪器可以检验肝、肾、心功能的指标。由于新冠肺炎疫情,目前主要检测新冠病毒。”李一荣说。
在进行核酸检测的“临床基础实验室(1)”门前,左侧贴有“重症污染区,非操作人员禁止入内”的字样。李一荣介绍,实验室里面正在消毒,刚完成核酸提取工作,是重度污染区。“病毒存在传染性,当把样本核酸提取后,可能会有病毒的残留,需要消毒一小时左右。”李一荣说。
再走进核酸扩张区,李一荣介绍,这里有PCR(聚合酶链式反应)扩增仪,病毒和核酸分子通过扩增仪可以从1个变为2个,2个变成4个,4个变成8个,扩增一次核酸数量以2倍扩增。由于是人为扩增就可以加入标记物,把核酸做了标记,可以通过自动化的仪器看到扩增过程,并同时检测。
李一荣指着电脑屏幕上的核酸扩增曲线图说:“一条线表示一个样本,当扩增到一定程度时会呈指数级别的增加,围成一个陡坡时就可以判断是阴性还是阳性了。”
李一荣表示,很多因素都可能导致核酸检测出现“假阴性”,但总体来说,核酸检测还是非常有价值的。他认为核酸检测是明确新冠肺炎的重要依据。由检测人员人为导致“假阴性”的可能性非常小,核酸检测阴性不能排除新冠病毒肺炎,但是核酸阳性的检测结果是具有确诊价值的。
【对话】
澎湃新闻
:请简述新型冠状病毒肺炎的核酸检测步骤。
李一荣:首先要把样本中新型冠状病毒的核酸提取出来,因为核酸是新冠病毒肺炎的重要组成部分;其次鉴别核酸是新冠病毒的核酸还是其它病毒核酸,通过PCR(聚合酶链式反应)的方法,把病毒核酸量扩增到一定程度,这样自动化的仪器就有可能识别;在扩增过程中要把病毒的核酸片段进行标记,让自动化的仪器能够看到。从理论上来讲,这种方法,只要有一个新冠病毒的核酸分子就能检测出来。
澎湃新闻:怎么看待有人认为核酸检测有50%的可能性是“假阴性”的观点?
李一荣:我个人不同意这种观点。根据我的检测经验,我们最高的检测阳性率是可以做到60%的。导致核酸检测出现“假阴性”的原因有很多,其中有三方面原因比较关键。第一个原因是样本采集问题,样本合格的标准是一定要采集到人体呼吸道的上皮细胞。第二个原因是病毒保存液。如果病毒可以保存下来,病毒里的核酸也能保存下来,如果病毒保存液不合格,失去功能,另外如果样本要经过很长时间才能到检验科,病毒核酸就可能被释放出来,一旦释放,核酸的长链会降解成很短的片段,就扩增不出来。第三个原因是跟试剂性能不足有关。此外,可能还跟患者本身有关,不少患者的感染部位在下肺,上呼吸道咽部病毒暂时没有,所以可能检测不到新冠病毒。但总体来说,核酸检测还是非常有价值的。我认为核酸检测是明确新冠肺炎的重要依据。由检测人员人为导致“假阴性”的可能性非常小,核酸检测阴性不能排除新冠病毒肺炎,但是核酸阳性的检测结果是具有确诊价值的。
澎湃新闻:怎么降低“假阴性”概率?
李一荣:第一,对采样人员进行培训,采到的样本不能是口水,不能是唾液,一定要含有咽部的上皮细胞。第二,使用规范的病毒保存液,如果仅使用生理盐水,这样容易导致病毒核酸降解,而且样本采集后不能放在常温时间过长,需要尽快送到检验科。第三,进一步对生产的核酸检测试剂盒评估,筛选出性能最佳的试剂供临床使用。如果以上三方面都做到了,应该可以降低核酸检测结果“假阴性”率。
澎湃新闻:如果每一个环节规范性操作,是不是一次核酸检测可当作检测结果?
李一荣:从理论上来讲是可以的。但是我们还是担心取样等因素,因为在出院过程中,很多患者还在用药,药物可能也有影响,国家制定两次核酸检测是为了避免漏掉没有完全清除病毒的病患。如果病毒没有完全清除,它也是具有传染性的。这个新冠病毒肺炎传染性特别强,从稳妥出发,两次检测是有必要的。
澎湃新闻:从疫情公开到现在,你们检验科工作人员的院感率是多少?
李一荣:到目前为止,我们检验科没有一名同事感染新冠病毒肺炎。我经常跟同事们强调一定做好防疫工作,要求同事戴好口罩,在实验室作业要戴手套,离开实验室要洗手。因为新冠病毒肺炎主要是两种传播方式,一是呼吸道传播,二是接触传播。那么戴好口罩可避免新冠病毒通过呼吸道进行传播,戴好手套可避免通过接触而感染新冠病毒。
澎湃新闻:检测的样本是来自哪些医院?
李一荣:主要来自武汉大学中南医院和武汉市第七医院,未来可能包括雷神山医院和武汉客厅方舱医院等。
澎湃新闻:一天需要检测多少份样本?
李一荣:2月10日,我们检测了520余份。最多一天,可以检测600份。
澎湃新闻:完成一次核酸检测周期是多长?
李一荣:我们用的是商品化试剂盒,不同的厂家推出的试剂盒是不一样的。核酸扩增及检测时间长短不一,短的80分钟,长的150分钟。另外完成100个样本的核酸提取,需要1-2小时,批量检测(96或100个样本)是3-4小时。
澎湃新闻:核酸提取区和核酸扩增区环境有哪些特殊要求?
李一荣:核酸检测必须拿到湖北省卫生厅颁发的许可证。实验室要求单向流动,试剂放在相对清洁的区域,房间换气设备正常,有生物安全柜,有移动紫外车,工作人员也必须通过相关培训。
澎湃新闻:确诊患者也需要做两次核酸检测吗?
李一荣:如果第一次核酸检测结果是阳性,结合临床表现就能明确病因。但核酸结果呈阴性的病患,当病人的症状、体征、接触史、流行病史支持新冠病毒肺炎的可能性,则还要继续做二次。因为核酸检测是明确新冠肺炎病原体的最重要的方法,对于感染者来说,反复采样是可以拿到阳性的结果。检验科的检验人员一定会对样本负责,做出什么结果就报告什么结果。
澎湃新闻:对于新冠肺炎,还有哪些尚未知道的?
李一荣:还有很多方面值得研究。一般认为新冠病毒肺炎传染源是蝙蝠,但是蝙蝠是不直接传给人,那么中间宿主是谁,这是不清楚的。其次,一旦感染新冠病毒肺炎,这个病毒是否会发生变异,我们也暂时不清楚。目前,国家科技部,国家自然科学基金委,湖北省等相关部门已经投入大量经费做新冠病毒肺炎的研究。我相信经过一段时间的研究,会有更多的谜团被解开。
(本文来自澎湃新闻,更多原创资讯请下载“澎湃新闻”APP)
责任编辑:徐笛
校对:丁晓
澎湃新闻报料:4009-20-4009   澎湃新闻,未经授权不得转载
关键词 >> 新冠肺炎 检测

相关推荐

评论(0)

热新闻

澎湃新闻APP下载

客户端下载

热话题

热门推荐

关于澎湃 在澎湃工作 联系我们 版权声明 隐私政策 澎湃广告 友情链接 澎湃新闻举报受理和处置办法 严正声明