武汉病毒所建立新冠小鼠感染模型，有望缓解动物模型紧张问题

新冠病毒感染的动物模型对新冠研究及疫苗评价等研究至关重要。此前的研究已知，新冠病毒（SARS-CoV-2）感染的受体为人血管紧张素转化酶（hACE2），然而由于与hACE2存在关键氨基酸位点差异，小鼠ACE2（mACE2）不能介导病毒入侵，因此SARS-CoV-2不能感染普通小鼠模型。

近日，中国科学院武汉病毒研究所/生物安全大科学研究中心研究员、新发传染病中心副主任张波团队建立了一种以甲病毒为载体的、快速高效的新型冠状病毒（SARS-CoV-2）小鼠感染模型，相关成果在线发表于国际学术期刊Cell Research （《细胞研究》）。论文题目为 “A mouse model for SARS-CoV-2 infection by exogenous delivery of hACE2 using alphavirus replicon particles”（一种由甲病毒载体递送hACE2基因的新型冠状病毒感染小鼠模型）。

武汉病毒所博士生张亚南、博士后李晓丹、博士生张哲瑞为论文共同第一作者。除张波之外，武汉病毒所叶寒青副研究员为论文的共同通讯作者。

研究团队称，在小鼠中表达hACE2是建立SARS-CoV-2感染模型的主要方法之一。甲病毒载体具有外源基因表达效率高、安全性好、宿主范围广的特点，被广泛用于疫苗、基因治疗和细胞转导等领域。

该研究以甲病毒属成员委内瑞拉马脑炎病毒（VEEV）复制子颗粒系统为载体表达hACE2受体（VEEV-VRP-hACE2）。研究首先证实了VEEV-VRP-hACE2能够使对SARS-CoV-2不易感的BHK-21和小鼠肺上皮细胞MLE-12转变为SARS-CoV-2易感细胞，在细胞水平上验证了该系统的可行性。

随后，研究团队通过小鼠体内实验结果表明，提前1天对BALB/c或C57BL/6鼻腔感染VEEV-VRP-hACE2，再感染SARS-CoV-2，能够在小鼠肺部检测到病毒复制和扩增，且病毒载量连续5天保持较高水平，小鼠肺部有明显的肺炎病症表现。

以上结果表明，VEEV-VRP-hACE2可将hACE2基因递送至小鼠呼吸道，建立一种新冠病毒小鼠感染模型。

研究团队还利用这一小鼠模型评价了新冠病毒的中和抗体及灭活病毒疫苗对病毒感染的治疗作用。结果显示，注射中和抗体及免疫灭活病毒疫苗的小鼠攻毒后肺部病毒载量显著降低，且病理损伤减轻，说明该模型能够很好地应用于中和抗体和疫苗的评价中。

一种新型冠状病毒肺炎小鼠动物模型的建立。（a-b）VEEV-VRP-hACE2表达验证（a）IFA；（b）Western blotting；（c）MLE-12和BHK-21感染VEEV-VRP-hACE2后可转变为SARS-CoV-2易感细胞；（d-e）SARS-CoV-2可在转导hACE2的（d）BALB/c以及（e）C57BL/6肺部高水平复制；（f）转导hACE2的BALB/c小鼠感染SARS-CoV-2后不同脏器病毒载量检测；（g）转导hACE2的BALB/c小鼠感染SARS-CoV-2后血相变化；（h）转导hACE2的BALB/c小鼠感染SARS-CoV-2后肺部病毒免疫荧光检测；（i）转导hACE2的BALB/c小鼠感染SARS-CoV-2后肺部病理特征；（j）注射中和抗体或（k）免疫灭活疫苗后的BALB/c转导hACE2，SARS-CoV-2攻毒后的肺部病毒载量。来源：武汉病毒所

研究团队认为，该感染模型能够在普通的BALB/c或C57BL/6小鼠上快速建模，构建周期短，不需要繁殖，可实现短期内大规模推广。该模型的建立有望缓解新冠病毒研究中动物模型紧张的问题。

论文链接：https://www.nature.com/articles/s41422-020-00405-5