Journal of Hepatology: Mas分子可保护小鼠免受APAP诱导的肝毒性

原创 瑞金感染科 瑞金感染

对乙酰氨基酚（APAP）是药物性肝损伤（DILI）的最常见原因，严重者会进展至肝衰竭，但是其治疗仍然十分有限。

Mas是一种G蛋白偶联受体，主要由Mas1基因编码，在肾素-血管紧张素系统发挥重要作用，其在APAP诱导的肝毒性中的作用尚未得到研究。

近期，来自同济大学附属同济医院的杨长青教授团队发现，肝内Mas表达在DILI患者和小鼠DILI模型中显著上调，Mas对肝细胞的激活增强了AKT-FOXO1依赖性脂肪自噬和下游FAO，Mas肝细胞激活可以保护小鼠免受APAP诱导的肝毒性，可能是DILI的新型治疗靶点！

一、 肝内Mas表达在DILI患者和小鼠APAP模型中上调

首先，研究人员发现Mas在DILI患者的肝脏中广泛表达上调。除此之外，使用不同剂量的APAP进行小鼠造模，同样观察到Mas表达随APAP剂量增加而增加，提示Mas与DILI的疾病进展相关，可能与DILI的病理生理机制密切相关（图1）。

图1 Mad肝内表达在DILI患者和APAP造模小鼠中表达增加

二、全身性 Mas1 缺乏加剧 APAP 诱导的小鼠肝毒性

之后，为了研究Mas在DILI中的作用，使用Mas1全身性缺乏小鼠进行APAP造模。结果发现，Mas1小鼠APAP造模后表现出严重的肝细胞死亡和炎症浸润（图2A-B），存活率严重降低（图2C），肝脏炎症，线粒体应激和细胞死亡标志物表达水平升高（图2D）。同时，使用数字自适应光学扫描光场相互迭代断层扫描（DAOSLIMIT）直观监测小鼠肝内的中性粒细胞和巨噬细胞，Mas1-APAP小鼠肝内中性粒细胞数量和活性均显著增加（图2F）。

图2 全身性 Mas1 缺乏会加剧 APAP 诱导的小鼠肝毒性

三、Mas1缺乏可导致APAP造模小鼠的脂肪自噬和FAO功能受损

使用转录组学（图3B）、蛋白质组学（图3 A）和代谢组学（图3C）分析探索APAP过量的肝内Mas信号通路，显示Mas1小鼠表现为脂肪酸降解和自噬受损（图3D），同时进行了验证（图3E）。透射电子显微镜（TEM）检测到Mas1-APAP小鼠的自噬液泡（AV）数量明显减少（图3F-G）。免疫荧光显示Mas1-APAP小鼠脂滴（BODIPY阳性点）的显着积累以及自噬受损（BODIPY/LAMP1共定位）和脂肪分解减少（BODIPY/ATGL共定位）（图3H-J）,TG累积（图3K）。之后使用Mas激活剂AVE0991活化Mas验证了上述发现，即Mas1缺乏可导致APAP造模小鼠的脂肪自噬和FAO功能受损，Mas活化可以通过增强脂肪自噬和FAO减轻肝损伤。

图3 Mas1缺乏可导致APAP造模小鼠的脂肪自噬和FAO功能受损

四、AKT和FOXO1参与APAP诱导的小鼠肝毒性中Mas的预防性调节的下游

研究人员在前述研究中发现AKT和FOXO1受到Mas调节，为了验证其是否是Mas的下游，使用其各自的抑制剂进行验证，包括perifosine (p-AKT的抑制剂), AS1842856 (FOXO1的抑制剂), 以及sirtinol (脱乙酰酶抑制剂)。在Mas1-APAP小鼠中，perifosine显著减轻了肝毒性和TG积累，增加了总FOXO1蛋白表达，增强了自噬、脂肪分解和FAO（图4A-C）。在WT-APAP小鼠中，AS1842856显着降低了AVE0991的作用并抑制了自噬，脂肪分解和FAO（图4D-F）。相比之下，sirtinol显着逆转了Mas1-APAP小鼠的疾病表型，激活的FOXO1的蛋白质水平增加，自噬，脂肪分解和FAO增强（图4G-J）。因此，在APAP攻击后，Mas可能通过负调控的AKT和FOXO1信号通路调节脂肪自噬和FAO。同时在细胞实验中验证了以上发现。

图4 AKT和FOXO1参与APAP诱导的小鼠肝毒性中Mas的预防性调节的下游

小结

该研究从新颖的肾素-血管紧张素系统的关键分子-Mas入手，提供了小鼠和DILI患者的数据，表明肝细胞特异性Mas信号传导的激活可以通过增强脂肪自噬和FAO来减轻APAP诱导的肝毒性，其下游取决于AKT信号通路的抑制和FOXO1信号通路的激活。该研究将肾素-血管紧张素系统作为全新的极具创新性的DILI靶点，有望为优化DILI患者的临床诊治提供新的思路。

参考文献

Hepatocyte-specific Mas activation enhances lipophagy and fatty acid oxidation to protect against acetaminophen-induced hepatotoxicity in mice. J Hepatol. 2023 Mar.

文字：付豪爽

原标题：《药物性肝损伤新靶点!Journal of Hepatology: Mas分子可保护小鼠免受APAP诱导的肝毒性》

阅读原文